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06/08 2023

体外培养过程及胚胎分级

何谓体外培养?
经诱导排卵后,在超音波监控下,于适当的时间点施打破卵针,之后经阴道超音波取卵,取出的卵子视成熟度于取卵后数小时进行授精(D0),随后置入培养箱培养至隔天观察受精状况(D1)
将正常受精卵继续培养并观察至分裂期胚胎 (D2/3)囊胚(D5/6),再将胚胎植回子宫腔内。若有多馀之胚胎则冷冻保存,以供日后使用。

授精方式有两种,分别为:
(1)自然受精
(2)单一精虫显微注射(Intracytoplasmic Sperm Injection; ICSI)

 

取卵当天(D0)卵子分级表
體胚分_工作區域 1
 

授精后培养第一天(D1) 观察受精状况
在精卵正常结合的状态下,可以观察到两个原核(2PN),除此之外都可视为异常受精如:NPN、1PN、3PN、非典型 3PN (2 大 1 小)等。
近期的研究显示, NPN、1PN、非典型 3PN (2 大 1 小)等受精卵,染色体套数仍有可能为双倍体,仍有机会形成囊胚,但形成囊胚的机率较低、怀孕跟活产的机率也较低,因此通常这类胚胎的植入,不会是第一优先的选择。

體胚分_工作區域 1 複本
 

受精后培养第三天(D3)观察分裂状况
观察项目:
1. 分裂速度: 观察分裂细胞的细胞分裂数目、细胞大小型态。
2. 碎片比例: 观察细胞质的碎片比例。
级别的好坏,依次是 A 级>A-级>B 级>C 级>D 级>E 级


體胚分_工作區域 1 複本 2
*第三天(D3)胚胎以 A-B 等级为相对较好的胚胎,但此与囊胚的形成率没有绝对相关,故参考价值较囊胚低。
*英文字后面的+-代表细胞大小是否均匀:
“+”:细胞大小均匀对称者
“-” :细胞大小不均者

 

受精后培养第五、六天(Day 5, 6)分裂状况
囊胚形成的天数是判断其发育潜能的重要指标。通常来说,D5 的最好,D6 的次之。
根据囊胚腔发育扩展比例与是否孵化来将囊胚的发育分为六个时期,处于 3 至 6 时期的囊胚,还需对其内细胞团和滋养层细胞进行质量分级。
體胚分_工作區域 1 複本 3

 

囊胚分级
囊胚期的胚胎,分为两个部分内细胞团(ICM)及滋养层细胞(TE),后续以这两个部分作为胚胎等级的评比。
A 级为最佳,代表细胞数是较多的,相对也较为緻密;B 级为中等;C 级为较差,代表细胞数是较少的。


(1) 内细胞团(ICM)数目及緻密度→未来形成胎儿
體胚分-05
(2) 滋养层(TE)细胞数目及排列緻密度→未来形成胎盘
體胚分-06

结语:
因为每个中心对于最低级别定义不太一样,比如有的接纳的最低级别囊胚是 3CC。但是,患者的卵多卵少,也会影响医师或客户对囊胚的取捨。
宏其生基有最资深的胚胎师,以最严谨的方式判断胚胎的等级,提供最真实的报告给客户。

 
 
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